17-3고성능액체크로마토그래피(HPLC)로 여러 성분이 섞인 시료를 다… | 2017년 식품안전기사실기(필답형) 3회차 기출문제 상세 페이지

[분리능을 높이는 방법]

① 시료를 칼럼(분리관)에 충분히 머무르게 한 뒤 용출시킨다.

② 성분끼리 머무름시간(retention time)이 충분히 벌어지도록 조건을 잡는다.

[영향을 주는 요인]

① 용량인자(capacity factor)

② 선택성(selectivity)

③ 칼럼효율(efficiency)

[해설]

두 성분이 갈라지는 정도는 분리도로 나타낸다. 분리도 식에는 용량인자·선택성·칼럼효율이 모두 들어 있다.

시료가 칼럼에 충분히 머무르면 성분이 갈라질 시간이 생긴다. 성분끼리 머무름시간 차이를 벌리면 봉우리가 서로 겹치지 않는다.

• 용량인자 — 성분이 정지상에 얼마나 오래 붙들려 있는지를 나타내며, 커지면 분리는 좋아지지만 분석시간이 길어진다.
• 선택성 — 두 성분의 분배계수 비로, 커질수록 봉우리 사이 간격이 벌어진다.
• 칼럼효율 — 이론단수로 나타내며, 클수록 봉우리가 좁고 날카로워진다.

실무에서는 선택성을 이동상 조성이나 정지상 종류로 조절한다. 칼럼효율은 칼럼 길이·충전제 입자 크기·유속으로 조절한다.