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1[변리사 1차] 08년 1회차
중합효소 연쇄반응(PCR)은 내열성을 가진 Taq중합효소를 사용하여 시험관 내에서 원하는 DNA를 증폭할 수 있는 실험 방법이다. PCR에 대한 설명으로 옳은 것을 보기에서 모두 고른 것은?
- ㄱ. DNA 가닥의 분리를 위하여 PCR 반응액에 helicase를 첨가한다.
- ㄴ. 일반적으로 annealing단계의 온도가 elongation 단계의 온도보다 높다.
- ㄷ. 여러 DNA의 혼합물에서 원하는 DNA부분만을 선택적으로 증폭할 수 있다.
- ㄹ. 일반적으로 denaturation → annealing → elongation 단계를 순서대로 반복한다.
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ㄱ,ㄴ
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ㄴ,ㄷ
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ㄷ,ㄹ
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ㄱ,ㄷ,ㄹ
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ㄴ,ㄷ,ㄹ
해설
PCR은 프라이머가 붙는 구간만 골라 증폭하며, 변성 → 결합 → 신장의 세 단계를 온도 순환으로 되풀이한다.
혼합물 속에 여러 종류의 DNA가 있어도 설계한 프라이머 두 개가 상보적으로 결합하는 부위 사이만 복제되므로, 원하는 표적 부분만 선택적으로 늘릴 수 있다. 한 순환마다 산물이 두 배가 되어 지수적으로 증폭된다.
- 가닥 분리는 헬리케이스가 아니라 약 95℃의 고온 변성으로 수소결합을 끊어서 이루어지며, 이 온도를 견디도록 내열성 Taq 중합효소를 쓰는 것이다.
- 프라이머가 붙는 결합(annealing) 온도는 대략 50~60℃로, Taq 중합효소의 최적 온도인 신장(elongation) 단계 약 72℃보다 낮다.
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