종자기사 암기자료(푸딩푸딩님 자료) PART6

RT-PCR 검정의 방법, 시료, 조건, 결과의 판정, 기타사항을 쓰시오.1. 검정 방법검정 대상 바이러스‧바이로이드는 1개씩 개별적으로 검정하거나 2개 이상또는 전체를 동시에 검정(다중검정) 할 수 있다.다중검정 결과가 명확하지 않는 경우에는 개별검정으로 재확인 한다.2. 검정 시료1점씩 개별검정 OR 10점 이하의 검정시료를 혼합하여 검정(혼합검정), 혼합검정 결과가 명확하지 않는 경우에는 개별검정으로 재확인 한다.3. 검정 조건작물별 바이러스․바이로이드 검정을 위한 RT-PCR 프라이머 조합은 (사과.배, 포도, 복숭아, 감귤 RT-PCR 프라이머 조합) 기준으로 하되, 최적 검정을 전제로 변형된 조건으로 사용할 수 있다. 이 경우 연구센터의 장은 사전에 그 적합성을 판단하여야 한다. 반응 혼합물의 조제와 증폭반응의 조건은 사용제품에 따른다.4. 검정결과의 판정RT-PCR 증폭산물을 아가로즈겔 전기이동을 실시하고 음성(미감염주) 및 양성 (감염주 또는 핵산) 대조군과 비교하여 해당 바이러스에 대한 증폭산물이 고유 밴드로 명확하게 나타나는 것을 감염주로 판정한다.5. 기타검정방법을 변경할 경우에는 무병화 과정을 시작하는 원원종부터 적용, 이미무병화 과정이 시작된 원원종 적용하지 아니한다.

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