HPLC에서 시료 성분의 분배계수(K)가 클 때와 작을 때를, 고정상에… | 2016년 식품안전기사실기(필답형) 2회차 기출문제 상세 페이지
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HPLC에서 시료 성분의 분배계수(K)가 클 때와 작을 때를, 고정상에 대한 친화력 및 칼럼을 지나는 속도(머무름시간)의 관점에서 각각 견주어 쓰시오.
(1) 분배계수가 클 때 :
(2) 분배계수가 작을 때 :
해설
(1) 고정상에 대한 친화력이 커서 칼럼을 느리게 통과한다(머무름시간이 길어 늦게 용리된다).
(2) 고정상에 대한 친화력이 작아 이동상을 따라 칼럼을 빠르게 통과한다(머무름시간이 짧아 일찍 용리된다).
[해설]
분배계수(K)는 성분이 고정상과 이동상에 나뉘어 있을 때의 농도비로, 값이 클수록 고정상에 더 많이 붙들려 있다는 뜻이다.
K = Cs / Cm (Cs는 고정상 농도, Cm은 이동상 농도)
- K가 클 때 — 고정상 친화력이 커서 칼럼을 느리게 지나므로 머무름시간이 길어 늦게 용리된다.
- K가 작을 때 — 성분이 주로 이동상을 따라 흘러 칼럼을 빨리 지나므로 머무름시간이 짧아 일찍 용리된다.
성분마다 K가 달라야 검출기에 닿는 시간이 갈려 분리된다.
HPLC의 이동상은 액체 용매이고, 운반기체는 GC에서 쓰는 이동상이니 헷갈리지 않는다.
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