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20-3어떤 효소 반응에서 기질농도를 바꿔 가며 초기반응속도를 측정하여… | 2020년 식품안전기사실기(필답형) 3회차 기출문제 상세 페이지

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20-3

어떤 효소 반응에서 기질농도를 바꿔 가며 초기반응속도를 측정하여 아래 표를 얻었다. 미하엘리스-멘텐 식 V0=Vmax[S]Km+[S]V_0 = \dfrac{V_{max}[S]}{K_m + [S]}을 이용하여 다음을 구하시오.

기질농도 [S] (mol/L)초기반응속도 V0V_0 (μmol/min)
0.5×1050.5 \times 10^{-5}12.50
0.75×1040.75 \times 10^{-4}56.25
1.0×1041.0 \times 10^{-4}60.00
1.0×1031.0 \times 10^{-3}75.00
1.0×1021.0 \times 10^{-2}75.00

(1) 최대반응속도 VmaxV_{max}가 75.00 μmol/min일 때의 KmK_m

(2) Km=[S]K_m = [S]인 조건에서의 반응속도 VV

해설

(1) Km=2.5×105K_m = 2.5 \times 10^{-5} mol/L

(2) V=37.50V = 37.50 μmol/min


[해설]

(1) Km 구하기

기질농도가 1.0×1031.0 \times 10^{-3} 이상에서 속도가 75.00으로 더 오르지 않으므로 이 값이 포화 상태의 최대속도 VmaxV_{max}이다. 미하엘리스-멘텐 식에 포화되지 않은 구간의 한 점을 대입한다. 숫자가 깔끔한 [S]=1.0×104[S] = 1.0 \times 10^{-4}, V0=60.00V_0 = 60.00을 쓰면

60.00=75.00×(1.0×104)Km+(1.0×104)60.00 = \dfrac{75.00 \times (1.0 \times 10^{-4})}{K_m + (1.0 \times 10^{-4})}

60.0075.00=0.8=1.0×104Km+1.0×104\dfrac{60.00}{75.00} = 0.8 = \dfrac{1.0 \times 10^{-4}}{K_m + 1.0 \times 10^{-4}}

Km+1.0×104=1.0×1040.8=1.25×104K_m + 1.0 \times 10^{-4} = \dfrac{1.0 \times 10^{-4}}{0.8} = 1.25 \times 10^{-4}

Km=1.25×1041.0×104=2.5×105K_m = 1.25 \times 10^{-4} - 1.0 \times 10^{-4} = \mathbf{2.5 \times 10^{-5}} mol/L

식을 Km=[S](VmaxV0)V0K_m = \dfrac{[S](V_{max} - V_0)}{V_0} 꼴로 정리해 두면 다른 행으로도 바로 검산할 수 있다. [S]=0.5×105[S] = 0.5 \times 10^{-5}, V0=12.50V_0 = 12.50을 넣으면 5×106×62.512.5=2.5×105\dfrac{5 \times 10^{-6} \times 62.5}{12.5} = 2.5 \times 10^{-5}, [S]=0.75×104[S] = 0.75 \times 10^{-4}, V0=56.25V_0 = 56.25를 넣으면 7.5×105×18.7556.25=2.5×105\dfrac{7.5 \times 10^{-5} \times 18.75}{56.25} = 2.5 \times 10^{-5}세 행이 모두 같은 값에 수렴한다.

(2) Km = [S]일 때의 속도

식의 분모에 KmK_m 대신 [S][S]를 넣으면

V=Vmax[S][S]+[S]=Vmax[S]2[S]=Vmax2V = \dfrac{V_{max}[S]}{[S] + [S]} = \dfrac{V_{max}[S]}{2[S]} = \dfrac{V_{max}}{2}

V=75.002=37.50V = \dfrac{75.00}{2} = \mathbf{37.50} μmol/min

이것이 바로 KmK_m의 정의다. 미하엘리스 상수 Km은 반응속도가 최대속도의 절반이 되는 기질농도이며, 단위가 농도(mol/L)인 이유도 여기에 있다. Km이 작을수록 낮은 기질농도에서도 최대속도의 절반에 도달하므로 효소와 기질의 친화력이 크다는 뜻이 된다.

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