HPLC에서 시료 성분의 분배계수(K)가 클 때와 작을 때를, 고정상에… | 2022년 식품안전기사실기(필답형) 2회차 기출문제 상세 페이지
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HPLC에서 시료 성분의 분배계수(K)가 클 때와 작을 때를, 고정상에 대한 친화력 및 칼럼을 지나는 속도(머무름시간)의 관점에서 각각 견주어 쓰시오.
(1) 분배계수가 클 때 :
(2) 분배계수가 작을 때 :
해설
(1) 고정상에 대한 친화력이 커서 칼럼을 느리게 통과한다(머무름시간이 길어 늦게 용리된다).
(2) 고정상에 대한 친화력이 작아 이동상을 따라 칼럼을 빠르게 통과한다(머무름시간이 짧아 일찍 용리된다).
[해설]
분배계수(K = Cs ÷ Cm)는 성분이 고정상과 이동상에 나뉘어 있을 때 두 상의 농도비이며, 크로마토그래피 분리의 근거다.
- K가 클 때 — 고정상에 강하게 붙들려 이동상에 실려 가는 시간이 적으므로 칼럼을 느리게 지나 머무름시간이 길다.
- K가 작을 때 — 주로 이동상에 머물러 흐름을 따라가므로 칼럼을 빨리 지나 머무름시간이 짧다.
크로마토그램에서는 K가 큰 성분이 뒤쪽 피크로, 작은 성분이 앞쪽 피크로 나온다. 혼동 주의: HPLC의 이동상은 액체 용매이고, 운반기체(질소·헬륨)는 GC의 이동상이다.
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